蛋白酶K

中文名称: 蛋白酶 K

CAS号: 39450-01-6

分子式: C29H27N2O12P

分子量: 626.504641

储存条件  2-8°C

用途 蛋白酶K由于能够消化角蛋白（kratin）因此被命名为蛋白酶K。蛋白酶K家族包含了各种由真菌、酵母及革兰氏阴性细菌分泌的细胞内肽酶，其中细菌分泌的酶有高度的序列相似性（>55%）。林伯氏白色念球菌（Tritirachiumalbum Limber）分泌产生蛋白酶K是该家族的模式蛋白。蛋白酶K对大多数底物均有切割活性，但是偏好于带有脂肪族及芳香烃的肽链。其属于丝氨酸蛋白酶，拥有典型的丝氨酸活性位点：Asp39–His69–Ser224 。其含有一个单练肽链包含277氨基酸位点，并拥有2个二硫键和一个空置的半胱氨酸位点以及两个钙离子结合位点。 蛋白酶K的应用主要为核酸提取时去除DNA酶和RNA酶，并且可将结合于基因组上的组蛋白去除，还可用于碱性磷酸酶的失活。目前分子生物学技术已应用于许多检测标准中，例如转基因检测、动物属性检测、致病微生物检测等。在分子生物学检测中核酸的提取质量直接影响了后续PCR反应的扩增效率。许多标准在核酸提取步骤中都设立了添加蛋白酶K消化的步骤，以期提取较纯的核酸。为了保护核酸，分子生物学核酸提取实验中通常含有EDTA等试剂，由于EDTA可以与金属离子络合，因此可能会导致酶活性受到影响；并且通常为pH8.0时和55℃条件下进行消化，不同pH值和温度条件会使得酶活性受到影响。